生姜丙酮干粉制备生姜蛋白酶
代景泉和黄雪松开发出分离纯化生姜蛋白酶的方法，该方法的特点是首先制备生姜丙酮干粉，再进行磷酸盐提取，接下来进行阴离子交换，最后获得精制生姜蛋白酶产品。 乡村网
( 1 )工艺流程
生姜鲤生姜丙酮千粉～提取液巫丝，盐析沉淀～透析液鲤离子交换纯化液～生姜蛋白酶粉
( 2 )主要步骤 本文来中国乡村网
① 制备生姜丙酮干粉称取定量生姜，洗净晾干后切成1cm2小块，与-20 ℃ 冷丙酮混合。冷丙酮的体积(ml 力用量为生姜质量(g )的5 倍。用组织捣碎机以16000r / min 转速粉碎5min 。
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真空抽滤，收集滤渣分散后于室温下风干至无丙酮味。过200目不锈钢筛网，收集过筛粉末，即得生姜丙酮干粉。其收得率为8%。 中国乡村网
② 制备生姜蛋白酶称取定量生姜丙酮干粉，加入其质量( g ) 20 倍体积(mL )、pH 8 . 0 的0 . lmol / L 磷酸缓冲液(含0 . 5mmol / L DTT , 2mmol / L EDTA ) ，搅拌浸提5min 。然后用绢布过滤，弃滤渣，收集滤液。
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③ 盐析在搅拌下，10min之内向滤液中加入固体硫酸铵，直至达到30 %饱和度，继续搅拌30min 后用离心机在4000r / min 转速下离心30min，收集沉淀置于透析膜中对NH ' OH 透析2h , 再对蒸馏水透析到无so 三检出时止。
④ 离子交换纯化 将活化的DE-52树脂(对生姜蛋白酶的交换容量为14.25U/g树脂)或DEAE-纤维素阳离子交换树脂(对牛姜蛋白酶的交换容量为1.2U / g 树脂)装柱，再分别用pH 值为8.16 、0.2mol / L NaCI 平衡或用pH 值为7.68 、0.01mol / L Tris-HCI 缓冲液(含2.3mol / L NaCI )平衡，接着将透析液加入，用0.05-lmol /L NaCI 溶液进行梯度洗脱，洗脱流速为0 . 75cm3 / min ，收集有生姜蛋白酶活性的洗脱液，进行浓缩、干燥。 http://xcwt.org/
( 3 )主要指标 http://xcwt.org/
白色粉末，生姜蛋白酶的收得率为2 .3 % ，总纯化倍数达到23 . 64 倍。 http://xcwt.org/
此外，张平平等也开发了分离纯化生姜蛋白酶的方法，其主要步骤与代景泉等的工艺接近，因而不再叙述。
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